Registro Completo |
Biblioteca(s): |
Epagri-Sede. |
Data corrente: |
08/08/2017 |
Data da última atualização: |
08/08/2017 |
Tipo da produção científica: |
Resumo em Anais de Congresso |
Autoria: |
MANENTI, D. C.; SOUTO, E. R.; NICKEL, O.; KVITSCHAL, M. V.; HAWERROTH, M. C.; SCHUH, F. S.; BRANCHER, T. L. |
Título: |
Levantamento da condição viral de acessos do Banco Ativo de Germoplasma de Macieira da Epagri utilizando métodos DAS-ELISA e RT-PCR. |
Ano de publicação: |
2017 |
Fonte/Imprenta: |
In: ENCONTRO NACIONAL DE FRUTICULTURA DE CLIMA TEMPERADO, 15., 2017, Fraiburgo. Resumos... Caçador: Epagri, 2017. p. 48 |
Idioma: |
Português |
Conteúdo: |
Um dos principais acervos de germoplasma de macieira no Brasil é o Banco Ativo de Germoplasma de Macieira da Epagri (BAG-Maçã), localizado em Caçador/SC, o qual é uma das fontes de variabilidade genética para o Programa de Melhoramento Genético de Macieira da Epagri. Contudo, o BAG-Maçã não está totalmente caracterizado quanto às características fenotípicas, genotípicas e condição fitossanitária de seus acessos, o que restringe ou até inviabiliza a utilização e intercâmbio desse germoplasma. Dessa forma, o objetivo do trabalho foi realizar a diagnose dos vírus ASGV, ASPV e ACLSV em alguns dos acessos do BAG-Maçã utilizando os métodos DAS-ELISA e RT-PCR. O trabalho foi desenvolvido no Laboratório de Biotecnologia da Epagri / Estação Experimental de Caçador. Foram analisados 27 acessos do BAG-Maçã para a presença dos vírus ASGV, ASPV e ACLSV. A diagnose foi realizada via teste DAS-ELISA (Double Antibody Sandwich - Enzyme-linked immunosorbent Assay), utilizando os kits completos da Bioreba®, seguindo as indicações do fabricante, e via técnica RT-PCR (Reverse Transcription - Polymerase Chain Reaction). As extrações de RNA foram realizadas pelo método de adsorção em sílica. A síntese do cDNA foi realizada utilizando o iniciador reverso para cada vírus. As reações de PCR foram ajustadas a um volume final de 15 µL. Os produtos de amplificação esperados foram 755 pb para o vírus ASGV (Nickel et al., 2001), 269 pb para o ASPV (Radaelli et al., 2006) e 358 pb para o ACLSV (Candresse et al., 1995), sendo os pares de iniciadores descritos pelos respectivos autores. Os produtos da PCR foram submetidos a eletroforese em gel de agarose a 1,2 % e visualizados sobre luz UV em fotodocumentador Kodak GelLogic 212 Pro. Todos os 27 acessos do BAG-Maçã da Epagri avaliados apresentam infecção por pelo menos um dos vírus ASGV, ASPV e ACLSV. MenosUm dos principais acervos de germoplasma de macieira no Brasil é o Banco Ativo de Germoplasma de Macieira da Epagri (BAG-Maçã), localizado em Caçador/SC, o qual é uma das fontes de variabilidade genética para o Programa de Melhoramento Genético de Macieira da Epagri. Contudo, o BAG-Maçã não está totalmente caracterizado quanto às características fenotípicas, genotípicas e condição fitossanitária de seus acessos, o que restringe ou até inviabiliza a utilização e intercâmbio desse germoplasma. Dessa forma, o objetivo do trabalho foi realizar a diagnose dos vírus ASGV, ASPV e ACLSV em alguns dos acessos do BAG-Maçã utilizando os métodos DAS-ELISA e RT-PCR. O trabalho foi desenvolvido no Laboratório de Biotecnologia da Epagri / Estação Experimental de Caçador. Foram analisados 27 acessos do BAG-Maçã para a presença dos vírus ASGV, ASPV e ACLSV. A diagnose foi realizada via teste DAS-ELISA (Double Antibody Sandwich - Enzyme-linked immunosorbent Assay), utilizando os kits completos da Bioreba®, seguindo as indicações do fabricante, e via técnica RT-PCR (Reverse Transcription - Polymerase Chain Reaction). As extrações de RNA foram realizadas pelo método de adsorção em sílica. A síntese do cDNA foi realizada utilizando o iniciador reverso para cada vírus. As reações de PCR foram ajustadas a um volume final de 15 µL. Os produtos de amplificação esperados foram 755 pb para o vírus ASGV (Nickel et al., 2001), 269 pb para o ASPV (Radaelli et al., 2006) e 358 pb para o ACLSV (Candresse e... Mostrar Tudo |
Palavras-Chave: |
ACLSV; ASGV; ASPV; Malus domestica; viroses. |
Categoria do assunto: |
G Melhoramento Genético |
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Marc: |
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