03355naa a2200169 a 450000100080000000500110000800800410001910000110006024500940007126000090016552027960017465300110297065300130298165300130299465300210300777301570302810792432011-08-10       2010    bl uuuu     u00u1 u    #d1 aEpagri  aEfeito da evolu????o t??cnica na efici??ncia na clonagem por handmade cloning em bovinos.  c2010  aLaborat??rios de pesquisa e empresas comerciais no Brasil produziram muitos clones bovinos nos ??ltimos anos empregando a metodologia cl??ssica de clonagem, n??o havendo ainda relatos cient??ficos sobre a evolu????o t??cnica da clonagem ou do nascimento de produtos utilizando a clonagem manual ou handmade cloning (HMC) no pa??s. O objetivo deste trabalho foi de determinar os efeitos do aumento da experi??ncia t??cnica na clonagem por HMC sobre as taxas de produ????o de embri??es e estabelecimento de prenhezes em bovinos durante tr??s per??odos de atividades (28 meses). Os resultados de produ????o in vitro de embri??es por HMC e o desenvolvimento in vivo subseq??ente obtidos em tr??s blocos de sete meses, com intervalos de tr??s meses entre cada per??odo, foram compilados como Per??odos 1 (P1), 2 (P2), e 3 (P3). Os embri??es bovinos clonados foram produzidos e transferidos para f??meas receptoras de acordo com a metodologia descrita anteriormente (Gerger et al., Genet Mol Res, 2010, 9:295-302). O dados relativos ??s taxas de produ????o de blastocisto, qualidade embrion??ria (Graus 1-3) e est??dio de desenvolvimento (Est??dios 5-9), baseados no Manual da IETS (Stringfellow & Seidel, IETS Manual, 1998, 173-176), bem como as taxas de prenhez no Dia 30 de gesta????o foram comparadas pelo teste do χ2, para p&lt0,05. Um total de 21.231 CCOs foi submetido ?? matura????o in vitro (MIV), com 5.432, 10.721 e 5.078 CCOs utilizados em 16, 18 e 10 rotinas no P1, P2 e P3, respectivamente. O desenvolvimento a blastocisto no Dia 7 aumentou de 15,5% (124/798) no P1, para 21,6% (309/1428) e 36,6% (280/764) no P2 e P3, respectivamente. Um aumento de 10 vezes na probabilidade de se obter blastocistos mais desenvolvidos (Est??dios 7 e 8/9) e com melhor qualidade morfol??gica (Grau 1) ocorreu do P1 ao P3, passando de 5,0% no P1 para 26,7% no P2, culminando em 49,7% no P3. As taxas de prenhez tamb??m aumentaram com a evolu????o t??cnica nos per??odos, sendo de 6,7% (2/30), 20,8% (10/48) e 40,0% (24/60) para P1, P2 e P3, respectivamente. A efici??ncia relativa para o estabelecimento de prenhezes aos 30 dias, baseada no n??mero total de CCOs utilizados (prenhezes por CCOs), aumentou significativamente de 0,04% (1:2.716) no P1 para 0,22% (1:460) no P2, finalmente alcan??ando 0,47% (1:212) no P3. Nossos resultados demonstraram uma melhoria significativa e gradual das taxas de desenvolvimento in vitro e in vivo de embri??es ao longo do tempo ap??s a clonagem, destacando a import??ncia do ganho de experi??ncia e conhecimentos t??cnicos sobre a efici??ncia global da t??cnica de HMC. Este trabalho tamb??m demonstrou a viabilidade da clonagem manual nas nossas condi????es, que foi traduzida pelo nascimento de uma bezerra clone da ra??a Nelore no Brasil por HMC em 2008.  aBovino  aClonagem  aEmbri??o  aHandmade cloning  tIn: REUNI??O ANUAL DA SOCIEDADE BRASILERIA DE TECNOLOGIA DE EMBRI??ES, 24., 2010, Porto de Galinhas, PE. Anais... Porto Alegre, RS: UFRGS, 2010. p. 803.