01902naa a2200241 a 450000100080000000500110000800800410001910000200006024501310008026000090021152012070022065300060142765300120143365300300144565300060147565300210148165300110150270000180151370000280153170000220155970000160158177300630159710662142009-09-11 2009 bl uuuu u00u1 u #d1 aFERREIRA, H. L. aComparative evaluation of conventional RT-PCR and real-time RT-PCR (RRT-PCR) for detection of avian metapneumovirus subtype A. c2009 aO metapneumovírus aviário (AMPV) pertence ao gênero Metapneumovirus, família Paramyxoviridae. Isolamento viral, sorologia e detecção do RNA genômico são atualmente as técnicas utilizadas para o diagnóstico desse agente. O objetivo do presente estudo foi comparar a detecção de RNA viral de seis isolados de AMPV, subtipo A (AMPV/A), utilizando diferentes métodos de RT-PCR convencional e real time RT-PCR (RRT-PCR). Duas novas técnicas de RT-PCR convencional e duas técnicas de RRT-PCR, ambas para a detecção dos genes da nucleoproteína (N) e da proteína de fusão (F), foram comparadas com um RT-PCR previamente estabelecido para a detecção do AMPV (gene da glicoproteína -G). Todos esses métodos foram capazes de detectar os isolados AMPV/A. As técnicas RRT-PCR (genes F e N) mostraram os menores limites de detecção (100.3 to 101 TCID50 mL-1). Os resultados sugerem que as técnicas RT-PCR convencional (gene F) e as técnicas de RRT-PCR (gene F e N) desenvolvidas no presente estudo podem ser utilizadas com sucesso para a detecção do AMPV/A. Além disso, o RRT-PCR gera resultados rápidos e sensíveis, o que o torna uma ferramenta alternativa para o isolamento viral. aF aGenes G aMetapneumovírus aviário aN aReal time RT-PCR aRT-PCR1 aSPILKI, F. R.1 aSANTOS, M. M. A. B. dos1 aALMEIDA, R. S. de1 aARNS, C. W. tCiência Rural, Santa Mariagv.39, n.5, p.1445-1451, 2009.