02864naa a2200205 a 450000100080000000500110000800800410001910000170006024501180007726000090019552021370020465300260234165300380236765300380240570000210244370000210246470000200248570000200250577301330252511264742017-08-07       2017    bl uuuu     u00u1 u    #d1 aCARLESSO, C.  aUso do cart??o 'FTA?? Plant Card' na extra????o de amostras de DNA de plantas de macieira.h[electronic resource]  c2017  aDiversos protocolos desenvolvidos para a extra????o de DNA de plantas podem ser utilizados com a cultura da macieira (ANTANAVICIUTE, 2015; REVERS et al., 2006; etc.), por??m necessitam de adapta????es para maior efici??ncia e, muitas vezes, s??o de dif??cil execu????o. Al??m disso, as amostras extra??das requerem condi????es especiais de armazenamento, principalmente em rela????o ao controle da temperatura. Com o uso do FTA?? Plant Card, ap??s a aplica????o do material vegetal sobre o cart??o a amostra pode ser conservada a temperatura ambiente por longos per??odos (at?? 14 anos), e o processo de extra????o de DNA ?? realizado pelos componentes presentes no cart??o (WHATMAN FTA??, 2017). Logo, o objetivo deste trabalho foi avaliar a efici??ncia do uso do FTA?? Plant Card na extra????o de amostras de DNA de macieira utilizadas em rea????es de PCR (rea????es em cadeia da polimerase).Amostras foliares da cultivar Fuji Precoce foram esfregadas sobre a superf??cie do FTA?? Plant Card. Foram picotados 1, 2, 3 e 4 discos do cart??o (≈ 1 mm de di??metro), os quais foram utilizados nas respectivas rea????es de PCR. A purifica????o do DNA presente nos discos foi realizada de acordo com o protocolo indicado pelo fabricante, com as altera????es realizadas por MBOGORI et al. (2006). A concentra????o dos componentes das rea????es de PCR foram as sugeridas por MBOGORI et al. (2006), variando a concentra????o do iniciador WD40: 0,1 mM e 0,05 mM, que ?? um iniciador constitutivo para a macieira (PERINI et al., 2014). Nas rea????es de PCR contendo 1 e 2 discos foram utilizados 20 ??L de mix de rea????o, e nos tubos com 3 e 4 discos foram utilizados 15 ??L. A efici??ncia das rea????es de PCR foi avaliada por meio da visualiza????o dos produtos de amplifica????o por eletroforese em gel de agarose 3% utilizando como refer??ncia o marcador de peso molecular de 50 pb. O uso do FTA?? Plant Card foi eficiente para a extra????o de DNA de macieira destinado a rea????es de PCR, sugerindo maior efic??cia quando utilizado nas concentra????es de 1 ou 2 discos por rea????o associado a 0,05 mM ou 0,1 mM do iniciador WD40.  aan??lises moleculares  aIsolamento e purifica????o de DNA  area????es em cadeia da polimerase1 aHAWERROTH, M. C.1 aKVITSCHAL, M. V.1 aBRANCHER, T. L.1 aGUIDOLIN, A. F.  tIn: ENCONTRO NACIONAL DE FRUTICULTURA DE CLIMA TEMPERADO, 15., 2017, Fraiburgo, SC. Resumos... Ca??ador, SC: Epagri, 2017. p. 47