03163nam a2200169 a 450000100080000000500110000800800410001910000230006024501500008326000300023330000100026352026500027365300100292365300130293365300230294665300240296911243002015-08-26       2015    bl uuuu  t   00u1 u    #d1 aSCHEUERMANN, K. K.  aDesenvolvimento de marcadores moleculares para o gene de resistência à brusone do arroz Pi9 - relatório técnico final.h[electronic resource]  aItajaí, SC: Epagric2015  a20 p.  aA brusone do arroz, causada pelo fungo Magnaporthe oryzae, é a doença mais severa da cultura, sendo responsável por perdas significativas de produtividade. A resistência genética é o método mais barato e eficaz de controle da doença. Entretanto, a instabilidade genética do patógeno, associado ao emprego de genes de resistência de forma isolada, tem contribuído para a curta durabilidade da resistência. Este projeto objetivou desenvolver um marcador molecular funcional para o gene de resistência à brusone de arroz Pi9, considerado um gene de resistência de amplo espectro. Avaliou-se inicialmente a acurácia do marcador molecular disponível para o gene Pi9. Para isso, testou-se o referido marcador em um grupo de 22 linhagens de arroz, das quais nove delas foram positivas para o gene Pi9. Os testes de patogenicidade demonstraram que todas as linhagens selecionadas foram suscetíveis contra pelo menos cinco, das quatorze raças do patógeno inoculadas. Por outro lado, a linhagem isogênica para o gene Pi9 IRBL9-W foi resistente a todas as raças testadas. Isso permitiu concluir que o marcador molecular atualmente em uso para o gene Pi9 não é acurado. Na tentativa de desenvolver um marcador molecular funcional para o gene Pi9, foi realizado o alinhamento de sequências de nucleotídeos dos seis membros que compõe o locus Pi9, a fim de identificar polimorfismos na região codificante deste gene. Entretanto, nenhuma das combinações de 21 oligonucleotídeos testadas foi específicas para o gene Pi9. O alinhamento da sequência de nucleotídeos do gene Pi9 com o genoma da cultivar Nipponbare, permitiu a identificação de polimorfismos na região regulatória do gene Pi9. Com isso foi possível o desenvolvimento do marcador KS28/KS6 que se mostrou específico a linhagem isogênica IRBL9-W. Com aplicação do marcador KS28/KS6 em um grupo de 201 germoplasmas de arroz, foi identificada a linhagem de arroz IR 9660-48-1-1-2, cuja presença do gene Pi9 foi confirmada por testes de patogenicidade. O marcador molecular foi então testado em analisador de DNA, o qual reproduziu os mesmos resultados daqueles obtidos em gel de agarose, sendo passível de ser utilizado em sistema automatizado. A análise genealógica da linhagem IR 9660-48-1-1-2 sugere que o gene Pi9 identificado é proveniente da linhagem KAK. A disponibilidade de um marcador molecular para o gene de resistência à brusone Pi9, associado à identificação de uma linhagem de arroz portadora deste gene, irá contribuir significativamente para o desenvolvimento de cultivares de arroz com maiores níveis de resistência à brusone.  aArroz  adoenças  aMagnaporthe oryzae  aseleção assistida