Data/hora: 16/06/2024 08:06:09

Biblioteca(s): | Epagri-Sede.
Tipo da produção científica: | Resumo em Anais de Congresso
Data corrente: | 07/08/2017
Data da última atualização: | 07/08/2017
Autoria: | CARLESSO, C.; HAWERROTH, M. C.; KVITSCHAL, M. V.; BRANCHER, T. L.; GUIDOLIN, A. F.
Título: | Uso do cartão 'FTA® Plant Card' na extração de amostras de DNA de plantas de macieira.
Ano de publicação: | 2017
Fonte/Imprenta: | In: ENCONTRO NACIONAL DE FRUTICULTURA DE CLIMA TEMPERADO, 15., 2017, Fraiburgo, SC. Resumos... Caçador, SC: Epagri, 2017. p. 47
Idioma: | Português
Conteúdo: | Diversos protocolos desenvolvidos para a extração de DNA de plantas podem ser utilizados com a cultura da macieira (ANTANAVICIUTE, 2015; REVERS et al., 2006; etc.), porém necessitam de adaptações para maior eficiência e, muitas vezes, são de difícil execução. Além disso, as amostras extraídas requerem condições especiais de armazenamento, principalmente em relação ao controle da temperatura. Com o uso do FTA® Plant Card, após a aplicação do material vegetal sobre o cartão a amostra pode ser conservada a temperatura ambiente por longos períodos (até 14 anos), e o processo de extração de DNA é realizado pelos componentes presentes no cartão (WHATMAN FTA®, 2017). Logo, o objetivo deste trabalho foi avaliar a eficiência do uso do FTA® Plant Card na extração de amostras de DNA de macieira utilizadas em reações de PCR (reações em cadeia da polimerase).Amostras foliares da cultivar Fuji Precoce foram esfregadas sobre a superfície do FTA® Plant Card. Foram picotados 1, 2, 3 e 4 discos do cartão (&#8776; 1 mm de diâmetro), os quais foram utilizados nas respectivas reações de PCR. A purificação do DNA presente nos discos foi realizada de acordo com o protocolo indicado pelo fabricante, com as alterações realizadas por MBOGORI et al. (2006). A concentração dos componentes das reações de PCR foram as sugeridas por MBOGORI et al. (2006), variando a concentração do iniciador WD40: 0,1 mM e 0,05 mM, que é um iniciador constitutivo para a macieira (PERINI et al., 2014). Nas reações de PCR contendo 1 e 2 discos foram utilizados 20 µL de mix de reação, e nos tubos com 3 e 4 discos foram utilizados 15 µL. A eficiência das reações de PCR foi avaliada por meio da visualização dos produtos de amplificação por eletroforese em gel de agarose 3% utilizando como referência o marcador de peso molecular de 50 pb. O uso do FTA® Plant Card foi eficiente para a extração de DNA de macieira destinado a reações de PCR, sugerindo maior eficácia quando utilizado nas concentrações de 1 ou 2 discos por reação associado a 0,05 mM ou 0,1 mM do iniciador WD40.
Palavras-Chave: | análises moleculares; Isolamento e purificação de DNA; reações em cadeia da polimerase.
Categoria do assunto: | G Melhoramento Genético
URL: | http://intranetdoc.epagri.sc.gov.br/producao_tecnico_cientifica/DOC_39615.pdf
Registro original: | Epagri-Sede (Epagri-Sede)
Exemplares: | Epagri-Sede - (101473-1) - UPC - PL - DD -  -  -  - DIS