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Registro Completo |
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Biblioteca(s): |
Epagri-Sede. |
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Data corrente: |
26/09/2019 |
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Data da última atualização: |
26/09/2019 |
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Tipo da produção científica: |
Resumo em Anais de Congresso |
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Autoria: |
BOSETTO, L.; HAWERROTH, M. C.; KVITSCHAL, M. V.; GUIDOLIN, A. F.; COIMBRA, J. L. M.; BRANCHER, T. L. |
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Título: |
Extração de DNA de macieira a partir da coleta de folhas em sílica. |
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Ano de publicação: |
2019 |
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Fonte/Imprenta: |
In: ENCONTRO NACIONAL SOBRE FRUTICULTURA DE CLIMA TEMPERADO, 16., 2019, Fraiburgo. Resumos... Caçador: Epagri, 2019. p. 63 |
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Idioma: |
Português |
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Conteúdo: |
A macieira (Malus x domestica Borkh.) é uma espécie cultivada de grande importância econômica, que tem sido alvo de várias pesquisas em diversos campos de estudo, dentre eles, a biologia molecular. A extração de DNA é um procedimento básico e essencial para a maioria das análises moleculares, optando-se por protocolos eficientes, rápidos e de baixo custo. Uma etapa prévia à extração é a coleta do material vegetal, que em muitos casos pode ser um fator determinante para a qualidade do DNA isolado. Um método que tem sido adotado atualmente, é a coleta de folhas em sílica gel, onde o tecido é seco e armazenado à temperatura ambiente até o momento da extração, sem a necessidade da manutenção do tecido em baixa temperatura. Nesse sentido, o presente trabalho teve por objetivo avaliar a efetividade da coleta de folhas de macieira, jovens e maduras, em sílica gel para a extração de DNA. A maior concentração de DNA foi obtida a partir de folhas jovens. Contudo, em ambos os tipos de tecido foliar apresentaram concentrações de DNA satisfatórias. Na análise de qualidade foram utilizadas as absorbâncias 260, 280 e 230, que correspondem à absorção de luz nos comprimentos de onda de ácidos nucleicos, proteínas e contaminantes, respectivamente (Nelson e Cox, 2014; Romano e Leal-Bertioli, 2015). A pureza do DNA é mensurada a partir de razões entre esses valores. O valor da razão A260/A280 aceitável é entre 1,8 e 2,0, sendo que valores menores indicam contaminação com proteínas, e valores maiores, com fenol (Romano e Leal-Bertioli, 2015). Uma medida de qualidade secundária é a razão A260/A230, para a qual são admitidos valores entre 1,8 e 2,2 (Desjardins e Conklin, 2010). Na presente avaliação, em ambos os tecidos foliares utilizados, as amostras de DNA apresentaram esses parâmetros dentro do recomendado, indicando que o estádio de desenvolvimento das folhas coletadas não interferiu na qualidade do DNA isolado. O método de coleta de folhas de macieira em sílica gel foi eficiente, possibilitando a obtenção de amostras de DNA de qualidade e concentração adequados para a realização de análises moleculares. MenosA macieira (Malus x domestica Borkh.) é uma espécie cultivada de grande importância econômica, que tem sido alvo de várias pesquisas em diversos campos de estudo, dentre eles, a biologia molecular. A extração de DNA é um procedimento básico e essencial para a maioria das análises moleculares, optando-se por protocolos eficientes, rápidos e de baixo custo. Uma etapa prévia à extração é a coleta do material vegetal, que em muitos casos pode ser um fator determinante para a qualidade do DNA isolado. Um método que tem sido adotado atualmente, é a coleta de folhas em sílica gel, onde o tecido é seco e armazenado à temperatura ambiente até o momento da extração, sem a necessidade da manutenção do tecido em baixa temperatura. Nesse sentido, o presente trabalho teve por objetivo avaliar a efetividade da coleta de folhas de macieira, jovens e maduras, em sílica gel para a extração de DNA. A maior concentração de DNA foi obtida a partir de folhas jovens. Contudo, em ambos os tipos de tecido foliar apresentaram concentrações de DNA satisfatórias. Na análise de qualidade foram utilizadas as absorbâncias 260, 280 e 230, que correspondem à absorção de luz nos comprimentos de onda de ácidos nucleicos, proteínas e contaminantes, respectivamente (Nelson e Cox, 2014; Romano e Leal-Bertioli, 2015). A pureza do DNA é mensurada a partir de razões entre esses valores. O valor da razão A260/A280 aceitável é entre 1,8 e 2,0, sendo que valores menores indicam contaminação com proteínas, e valores ma... Mostrar Tudo |
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Palavras-Chave: |
isolamento de DNA; Malus domestica Borkh; protocolo CTAB 2%. |
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Categoria do assunto: |
G Melhoramento Genético |
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Marc: |
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